Ginkgo-biloba-Extrakte verbessern die Aderhautzirkulation und führen so zur Unterdrückung der Kurzsichtigkeit bei Mäusen

Wissenschaftliche Berichte Band 13, Artikelnummer: 3772 (2023) Diesen Artikel zitieren

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Myopie kommt weltweit immer häufiger vor, was die Entwicklung präventiver Methoden erforderlich macht. Wir untersuchten die Aktivität des Proteins Early Growth Response 1 (EGR-1) und entdeckten, dass Ginkgo biloba-Extrakte (GBEs) EGR-1 in vitro aktivierten. In vivo wurden C57BL/6 J-Mäuse entweder mit normalem oder 0,0667 % GBEs (200 mg/kg) gemischtem Futter (jeweils n = 6) gefüttert und Myopie wurde mit –30 Dioptrien (D)-Linsen im Alter von 3 bis 6 Wochen induziert . Brechung und axiale Länge wurden mit einem Infrarot-Photorefraktor bzw. einem SD-OCT-System gemessen. Bei Mäusen mit linseninduzierter Myopie verbesserten orale GBEs die Brechungsfehler (−9,92 ± 1,53 D vs. − 1,67 ± 3,51 D, p < 0,001) und die axiale Dehnung (0,22 ± 0,02 mm vs. 0,19 ± 0,02 mm, p < 0,05) signifikant. . Um den Mechanismus von GBEs zur Verhinderung des Fortschreitens der Myopie zu bestätigen, wurden die 3 Wochen alten Mäuse in normal ernährte Gruppen mit entweder kurzsichtig oder nicht kurzsichtig induzierten Gruppen und GBEs, die entweder mit kurzsichtig induzierten oder nicht kurzsichtig induzierten Gruppen gefüttert wurden, eingeteilt (jeweils n = 10). Die Durchblutung der Aderhaut wurde mittels optischer Kohärenztomographie-Angiographie (OCTA) gemessen. In beiden nicht kurzsichtig induzierten Gruppen verbesserten orale GBEs im Vergleich zu normalem Futter die Aderhautblutperfusion (8,48 ± 15,75 % Fläche vs. 21,74 ± 10,54 % Fläche, p < 0,05) und die Expression von Egr-1 und endothelialer Stickoxidsynthase signifikant ( eNOS) in der Aderhaut. In beiden myopieinduzierten Gruppen verbesserten orale GBEs im Vergleich zu normalem Futter auch die Durchblutung der Aderhaut (− 9,82 ± 9,47 % Fläche vs. 2,29 ± 11,84 % Fläche, p < 0,05) und korrelierten positiv mit der Veränderung der Aderhautdicke. Diese Ergebnisse legen nahe, dass GBEs das Fortschreiten der Myopie hemmen können, indem sie die Durchblutung der Aderhaut verbessern.

Myopie ist eine schwerwiegende Augenerkrankung, von der Menschen auf der ganzen Welt betroffen sind, und es wird erwartet, dass bis 2050 die Hälfte der Weltbevölkerung kurzsichtig sein wird, da die Inzidenz von Myopie von Jahr zu Jahr zunimmt1,2,3. Mit dem Ausbruch des neuartigen Coronavirus und einer Reihe von Lockdowns und häuslichen Quarantänemaßnahmen haben Einschränkungen bei Outdoor-Aktivitäten das Thema Myopie wiederbelebt4,5. Die Beseitigung oder Verringerung der Entwicklung von Myopie ist ein ernstes Problem, das nicht ignoriert werden kann.

Derzeit gibt es verschiedene Strategien, um das Fortschreiten der Myopie einzudämmen. Neben den bekannten pharmakologischen Eingriffen (z. B. Atropin, Pirenzepin, 7-Methylxanthin) und optischen Eingriffen (z. B. Orthokeratologie, periphere Defokussierungslinsen)6,7 hat sich auch ein längerer Aufenthalt im Freien als einer der sichersten und sichersten Eingriffe erwiesen wichtige Strategien zur Reduzierung der Entwicklung von Myopie8,9,10. Der wichtigste Faktor dafür, dass man mehr Zeit im Freien verbringt, ist die Einwirkung von hellem Außenlicht11.

Außenlicht hat eine spektrale Zusammensetzung, die eher von kurzwelligen sichtbaren Komponenten wie Blau und Grün als von Rot dominiert wird12. Darüber hinaus wurde berichtet, dass blaues Licht Myopie hemmt13. In unseren früheren Studien wurde gezeigt, dass violettes Licht in der Außenumgebung, das eine kürzere Wellenlänge als blaues Licht hat, die Entwicklung von Myopie bei Küken- und Maus-Myopiemodellen sowie beim Menschen unterdrückt. Darüber hinaus reguliert die Exposition gegenüber violettem Licht das Myopie-unterdrückende Gen hoch Egr-1 sowohl in vitro als auch in vivo14,15. Egr-1 ist ein proteinkodierendes Gen, das die axiale Verlängerung und das Fortschreiten der Myopie steuert16,17,18. Darüber hinaus zeigten Egr-1-Knockout-Mäuse eine längere axiale Länge und eine kurzsichtige Brechungsverschiebung19,20,21. Da wir erkannten, dass die Egr-1-Expression als Evaluierungsgen für die Unterdrückung von Myopie verwendet werden könnte, führten wir Luciferase-Assays in der kultivierten Zelllinie durch, um 207 natürliche Substanzen und organische Chemikalien zu screenen, und stellten fest, dass die Reinheit des Crocetin-haltigen Gardenia-Fruchtextrakts 75 % oder mehr betrug A demonstrierte die maximale Aktivierung von EGR-122. Crocetin unterdrückt nachweislich die Entwicklung experimenteller Myopie bei Mäusen und kann eine unterdrückende Wirkung auf das Fortschreiten der Myopie bei Kindern haben22,23. Es wurde festgestellt, dass Ginkgo-biloba-Extrakte (GBEs) der zweitstärkste Aktivator von EGR-122 sind. Daher ist davon auszugehen, dass GBEs wie Crocetin auch eine hemmende Wirkung auf das Fortschreiten der Myopie haben.

Ginkgo ist ein großer Baum mit fächerförmigen Blättern. Ursprünglich stammt sie aus China, Japan und Korea, wird aber inzwischen auch in Europa und den Vereinigten Staaten angebaut. Die traditionelle chinesische Medizin nutzt die Früchte und Samen des Ginkgo biloba-Baums seit über 5000 Jahren und gibt Empfehlungen zur Behandlung von Asthma, Husten und Enuresis24,25. Ein deutsches Pharmaunternehmen entwickelte 1964 einen Ginkgo-Biloba-Extrakt mit dem Namen EGb 761, und seitdem haben Hunderte von Forschungsarbeiten die Wirkung von Ginkgo in Menschen- und Tiermodellen untersucht26. Nach jahrzehntelanger hartnäckiger Forschung konnte gezeigt werden, dass GBEs ein breites Spektrum an biologischen Wirkungen aufweisen, darunter antioxidative27, antivirale28, entzündungshemmende29,30, antitumorale31,32, immunmodulierende33 und hepatoprotektive Eigenschaften34. Bemerkenswerterweise haben sich GBEs aufgrund ihrer positiven Wirkung auf die Blutzirkulation auch als potenzielle Behandlung für Glaukom und andere ischämische Augenerkrankungen erwiesen35,36. Eine zunehmende axiale Dehnung bei Myopie führt zu einer Ausdünnung des Netzhaut-, Aderhaut- und Skleralgewebes und beeinträchtigt die Augendurchblutung. Es wurde festgestellt, dass bei Meerschweinchen die Dicke der Aderhaut und die Durchblutung der Aderhaut während der experimentellen Myopie-Induktion abnahmen und dann während der Erholung zunahmen37,38,39. Daher führten wir eine Studie durch, um weiter zu untersuchen, ob die orale Gabe von GBEs das Fortschreiten der experimentellen Myopie in einem Mausmodell unterdrücken kann, und um festzustellen, ob GBEs die Myopie hemmen, indem sie die Durchblutung der Aderhaut erhöhen.

Die Auswirkung unterschiedlicher Konzentrationen von GBEs auf die Aktivität von EGR-1 wurde durch humane embryonale Nieren-Adeno-assoziierte Virus-EGR-1-Luc-Zelllinien (HEK 293AAV EGR-1-Luc-Zelllinien) nachgewiesen. Diese Zelllinie wurde in einer Reihe erhalten von Transfektion und Passagen der HEK 293AAV-Zelllinie, die von Cell Biolabs, Inc. erworben wurde. In dieser Studie wurden drei Konzentrationen, 0,25 mg/ml, 0,50 mg/ml und 0,75 mg/ml GBEs, für die EGR-1-Aktivität verwendet In den Tests wurde Dimethylsulfoxid (DMSO) ohne Verbindungen als Negativkontrolle und Phorbol-12-myristat-13-acetat (PMA) als Positivkontrolle verwendet (n = 6 für jede Gruppe). Die Werte der Versuchsgruppe und der Positivkontrollgruppe werden als Vielfache im Vergleich zur Negativkontrollgruppe angezeigt. Im Vergleich zur negativen Kontrollgruppe zeigte die positive Kontrollgruppe einen statistisch signifikanten Anstieg der EGR-1-Aktivität, die Aktivierung betrug das 3,57 ± 0,65-fache (p < 0,001). Für 0,25 mg/ml GBEs betrug die EGR-1-Aktivierung das 1,59-fache ± 0,13-fache (p < 0,001), für 0,50 mg/ml GBEs betrug die EGR-1-Aktivierung das 1,77-fache ± 0,40-fache (p < 0,01) und für 0,75 mg/ml GBEs betrug die EGR-1-Aktivierung das 1,17 ± 0,60-fache (p = 0,520) (Abb. 1).

Auswirkungen verschiedener GBEs-Konzentrationen auf die EGR-1-Aktivierung in einem Luciferase-Assay. GBEs wurden in drei verschiedenen Dosen getestet und sowohl 0,25 mg/ml als auch 0,5 mg/ml GBEs-Konzentrationen zeigten einen statistisch signifikanten Anstieg der EGR-1-Aktivität in einem Luciferase-Assay (n = 6). **p < 0,01, ***p < 0,001. Balken stellen mittlere +/− Standardabweichungen dar. Für die statistische Analyse wurde die einfaktorielle ANOVA verwendet. EGR-1: frühes Wachstumsreaktionsprotein 1; GBEs: Ginkgo biloba-Extrakte; DMSO: Dimethylsulfoxid; PMA: Phorbol-12-Myristat-13-Acetat.

Die Wirkung der oralen Verabreichung von GBEs auf das Fortschreiten der Myopie wurde in einem Mausmodell für linseninduzierte Myopie (LIM) untersucht. Das Modell entspricht in etwa dem zuvor etablierten40, mit der Ausnahme, dass die monokulare Induktion von Myopie in die gleichzeitige Induktion von Myopie in beiden Augen geändert wird, was besser mit der Anordnung unseres Experiments übereinstimmt. Die von uns für die orale Verabreichung ausgewählte Konzentration an GBEs betrug 0,0667 % (200 mg/kg/Tag), was die höchste Konzentration darstellte, ohne bei Mäusen hepatotoxische Reaktionen hervorzurufen. In dieser Studie wurde nur die höchste GBE-Dosis im sicheren Bereich verwendet, um zu untersuchen, ob sie eine hemmende Wirkung auf Myopie hat. Die Mäuse wurden basierend auf Linsen und Ernährung in drei Gruppen eingeteilt: normales Futter mit 0 Dioptrien (D)-Linsengruppe (Kontrollgruppe 0 D), normales Futter mit −30 D-Linsengruppe (Kontrollgruppe − 30 D) und 0,0667 % GBEs gemischtes Chow mit − 30 D-Linsengruppe (die GBEs − 30 D-Gruppe) (n = 8 für jede Gruppe). In den beiden Gruppen, die mit normalem Futter gefüttert wurden, hatten Augen, die mit einer Linse mit −30 D behandelt wurden, eine signifikant höhere Brechungsverschiebung als Augen, die mit 0 D behandelt wurden (−9,92 ± 1,53 D vs. + 11,14 ± 6,60 D, p < 0,001) ( Abb. 2A). Im Vergleich zur normalen Chow-Gruppe mit einer −30 D-Linse zeigten Mäuse, denen GBEs-Mischfutter verabreicht wurde, eine deutlich geringere Brechungsänderung mit einer −30 D-Linse (−9,92 ± 1,53 D vs. − 1,67 ± 3,51 D, p < 0,001) (Abb . 2A). Die axialen Längenänderungen waren wie folgt: Die mit −30 D-Linsen behandelten Augen zeigten im Vergleich zu den mit 0 D-Linsen behandelten Augen in normalen Chow-Gruppen eine signifikante axiale Verlängerung (0,22 ± 0,02 mm gegenüber 0,19 ± 0,01 mm, p < 0,01). (Abb. 2B). In den Augen mit − 30 D-Linsen zeigte die GBEs − 30 D-Gruppe eine deutlich geringere axiale Verlängerung im Vergleich zur Kontrollgruppe − 30 D (0,19 ± 0,02 mm vs. 0,22 ± 0,02 mm, p < 0,05) (Abb. 2B) . Diese Ergebnisse legen nahe, dass in einem murinen LIM-Modell die orale Verabreichung von GBEs eine Brechungsverschiebung und eine axiale Verlängerung reduzierte. Darüber hinaus haben wir auch die Veränderung der Summe aus Hornhautdicke und Vorderkammertiefe sowie die Veränderung der Linsendicke in den drei Gruppen von Mäusen gemessen, und es wurden keine signifikanten Veränderungen beobachtet (ergänzende Abbildung 1). Mehrere Studien haben gezeigt, dass die axiale Länge besonders mit der Aderhautdicke bei Myopie zusammenhängt41,42,43,44. Daher gehen wir davon aus, dass die durch Myopie induzierte axiale Längenverlängerung auch die damit verbundene Aderhautreaktion mit sich bringt.

GBEs unterdrückten eine myopische Brechungsverschiebung und eine axiale Verlängerung in einem murinen LIM-Modell signifikant. (A). In den Kontrollgruppen mit 0 D und −30 D hatten die mit −30 D-Linsen behandelten Augen eine signifikant größere Brechungsverschiebung als die mit 0 D-Linsen behandelten Augen (p < 0,001). Im Vergleich zur Kontrollgruppe mit −30 D zeigten Mäuse in der GBEs-Gruppe mit −30 D eine signifikant verringerte Brechungsverschiebung (p < 0,001) (n = 8). (B). Im Vergleich zur Kontrollgruppe mit 0 D zeigte die Kontrollgruppe mit −30 D eine signifikante axiale Verlängerung (p < 0,01). Im Vergleich zur Kontrollgruppe − 30 D zeigte die GBEs − 30 D-Gruppe eine deutlich geringere axiale Verlängerung (p < 0,05) (n = 8). *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, Balken stellen mittlere +/− Standardabweichungen dar. Zur Bestimmung signifikanter Unterschiede wurde die einfaktorielle ANOVA verwendet.

Um den Unterdrückungsmechanismus des Fortschreitens der Myopie zu demonstrieren, wurden die Mäuse nach dem Zufallsprinzip in vier Gruppen eingeteilt: Gruppe mit 0D-Linsen und normaler Ernährung (Kontrolle 0D), Gruppe mit 0D-Linsen und GBEs-Ernährung (GBEs 0D), Gruppe mit binokularer Myopie, die mit normaler Ernährung induziert wurde (Kontrolle −). 30D) und binokulare Myopie, die mit der GBEs-Diätgruppe induziert wurde (GBEs − 30D) (n = 10 für jede Gruppe). Die Durchblutung der Aderhaut wurde mittels optischer Kohärenztomographie-Angiographie (OCTA) gemessen, die En-face- und B-Scan-Bilder der Aderhautgefäßsysteme liefern kann. Im gesamten En-Gesichtsbild (Abb. 3A-1) wird für die OCTA-Fotografie ein quadratischer Rahmen mit einer Größe von 9 mm (Breite) \(\times\) 9 mm (Länge) ausgewählt, um ein teilweise zentriertes En-Gesichtsbild zu erhalten am Sehnerv (Abb. 3A-2). Als einheitlicher Standard wurde das B-Scan-Bild analysiert, das horizontalen Linien entspricht, die im En-Face-Angiogramm durch das Sehnervenzentrum verlaufen. Im relativen B-Scan-Bild wird die Aderhaut durch den weiß hervorgehobenen Signalbereich in der gelben Spule dargestellt (Abb. 3A-3). Bei zusätzlicher Angiographie stellen die roten Punkte die Signale ohne Blutperfusion dar, während der Bereich hinter den roten Punkten den Bereich darstellt, durch den die Blutperfusion verläuft (Abb. 3A-4). Der Anteil roter Pixel in der Aderhautregion wurde mit ImageJ gemessen und die Aderhautblutperfusion wurde durch Bewertung des Prozentsatzes nichtroter Pixel in der gesamten Aderhautregion berechnet. Im Histogramm der Veränderung der Aderhautblutperfusion zeigten Mäuse in der GBEs-0D-Gruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe 0D eine signifikant größere Veränderung der Blutperfusion (8,48 ± 15,75 % Fläche vs. 21,74 ± 10,54 % Fläche, p < 0,05). Nach dreiwöchiger Fütterung zeigten Mäuse in der Kontrollgruppe − 30D unterdessen eine Abnahme der Aderhautblutperfusion (8,48 ± 15,75 % Fläche vs. − 9,82 ± 9,47 % Fläche, p < 0,01). Im Falle einer Myopie-Induktion war die Aderhautblutperfusion in der GBEs − 30D-Gruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe − 30D verbessert (2,29 ± 11,84 % Fläche vs. – 9,82 ± 9,47 % Fläche, p < 0,05) (Abb. 3B) .

GBEs erhöhten die Durchblutung der Aderhaut in einem Mausmodell. (A). Die Durchblutung der Aderhaut wurde mittels OCTA gemessen, was ein Aderhaut-Enface-Angiogramm und einen entsprechenden B-Scan ermöglicht. (A-1). En-face-Angiographiebild. (A-2). Angiographie von 9 mm Länge und Breite, zentriert auf den Sehnerv. (A-3). Das En-Face-Angiogramm entspricht dem B-Scan-Bild. Die Aderhautregion ist im B-Scan-Bild gelb eingekreist. (A-4). OCTA erstellte ein B-Scan-Angiogramm der Aderhautschicht. Der Anteil der roten Punkte in der Aderhautregion wurde mit dem Flächenmesstool in ImageJ berechnet. Die Fläche hinter dem roten Punkt (100-%-Fläche) ist die Aderhautblutperfusionsfläche. (B). Die Veränderungen der Aderhautblutperfusion nach 3-wöchiger GBEs-Fütterung waren signifikant höher als in der Gruppe mit normaler Ernährung, unabhängig davon, ob eine Myopie-Induktion durchgeführt wurde (p < 0,05) (n = 10). *p < 0,05, **p < 0,01, Balken stellen mittlere +/− Standardabweichungen dar. Zur Bestimmung signifikanter Unterschiede wurde die einfaktorielle ANOVA verwendet.

Um den Mechanismus von GBEs bei der Hemmung des Fortschreitens der Myopie weiter zu verifizieren, haben wir die Aderhaut- und Netzhautproben von den Mäusen in der Kontroll-0D-Gruppe und der GBEs-0D-Gruppe für Echtzeit-PCR gesammelt (n = 8 für jede Gruppe). Die Ergebnisse zeigten eine signifikant erhöhte Egr-1-mRNA-Expression in der Aderhaut nach 3-wöchiger GBE-Fütterung im Vergleich zur Kontrollgruppe, die 3 Wochen lang mit normalem Futter gefüttert wurde (7,11 ± 4,5-fach gegenüber 2,34 ± 2,52-fach, p < 0,05). In der Netzhaut war die Egr-1-mRNA-Expression nach 3-wöchiger GBEs-Fütterung im Vergleich zur Kontrollgruppe signifikant hochreguliert (1,69 ± 0,73-fach gegenüber 1,11 ± 0,53-fach, p < 0,05) (Abb. 4A). Darüber hinaus war die eNOS-mRNA-Expression in der Aderhaut nach 3-wöchiger GBEs-Fütterung im Vergleich zur Kontrollgruppe signifikant hochreguliert (2,56 ± 0,97-fach gegenüber 0,72 ± 0,55-fach, p < 0,01) (Abb. 4B).

Die mRNA-Expression von Egr-1 und eNOS wurde in der Aderhaut durch die Verabreichung von GBEs signifikant hochreguliert. (A) Die Egr-1-mRNA-Expression zeigte einen signifikanten Anstieg in den Aderhaut- und Netzhautproben nach 3 Wochen oraler GBEs-Verabreichung im Vergleich zur normalen, mit Futter gefütterten Kontrollgruppe (p < 0,05) (n = 8). (B) Die eNOS-mRNA-Expression zeigte auch einen signifikanten Anstieg der Aderhaut nach 3-wöchiger GBEs-Fütterung im Vergleich zur Kontrollgruppe (p < 0,01) (n = 8). *p < 0,05, **p < 0,01, Balken stellen mittlere +/− Standardabweichungen dar. Ch: Aderhaut; R: Netzhaut; GBEs: Gingko biloba-Extrakte.

Die oben genannten Experimente haben bestätigt, dass die Verabreichung von GBEs die Blutperfusion in der Aderhaut erhöhen kann, unabhängig davon, ob sie mit einer Myopie-Induktion einherging. Anschließend wurden Mäuse, die 0D-Linsen trugen, mit normalem Futter bzw. 0,0667 % GBEs-Futter gefüttert, um den Einfluss von Veränderungen der Aderhautdurchblutung, die durch die Verabreichung von GBEs verursacht wurden, auf die Dicke der Aderhaut zu untersuchen. Die Dicke der Aderhaut wurde nach dreiwöchiger Fütterung gemessen Die Aderhautdicke ist in der 0,0667 % GBEs-Chow-Gruppe deutlich dicker (ergänzende Abbildung 2). Danach wurde bei 3 Wochen alten Mäusen Myopie induziert und bis zum Alter von 6 Wochen mit normalem Futter oder 0,0667 % GBEs-Mischfutter gefüttert. Die Veränderungen der Aderhautdicke vor und nach der Fütterung wurden zwischen den Gruppen verglichen (n = 6 für jede Gruppe). . In der Kontrollgruppe mit −30 D zeigte sich im Vergleich zur Kontrollgruppe mit 0 D eine signifikante Abnahme der Aderhautdicke (−1,55 ± 0,47 µm vs. + 2,10 ± 0,80 µm, p < 0,001) (Abb. 5). Im Vergleich zur Kontrollgruppe mit −30 D zeigten Mäuse in der GBEs-Gruppe mit −30 D eine deutlich geringere Änderung der Aderhautdicke (−1,55 ± 0,47 µm vs. − 0,28 ± 0,81 µm, p < 0,01) (Abb. 5). Diese Ergebnisse untermauern weiter bestehende Beweise dafür, dass die Veränderung der Aderhautblutperfusion positiv mit der Veränderung der Aderhautdicke in einem murinen LIM-Modell korreliert.

Die Verabreichung von GBEs reduzierte die Ausdünnung der Aderhaut. Die beiden Gruppen, die normales Futter erhielten, zeigten einen signifikanten Unterschied in der Aderhautdicke zwischen der Gruppe mit −30 D-Linsen und der Gruppe mit 0 D-Linsen (p < 0,001). Mäuse, denen GBEs-Futter mit −30 D-Linsen verabreicht wurde, zeigten einen statistisch signifikanten Anstieg der Aderhautdicke im Vergleich zur normalen Futtergruppe mit −30 D-Linsen (p < 0,01) (n = 6). **p < 0,01, ***p < 0,001, Balken stellen mittlere +/− Standardabweichungen dar. Für die statistische Analyse wurde die einfaktorielle ANOVA verwendet. Kontrolle 0 D: Mäuse, die mit normalem Futter gefüttert wurden und 0 D-Linsen in beiden Augen hatten; Kontrolle – 30 D: Mäuse, die mit normalem Futter gefüttert wurden, mit – 30 D-Linsen in beiden Augen; GBEs − 30 D: mit GBEs gefütterte Mäuse mit − 30 D-Linsen in beiden Augen.

In dieser Studie wurde die Aktivierung von GBEs in vitro für EGR-1 mithilfe eines Luciferase-Assays gemessen und die dosisabhängige Aktivierung von GBEs für EGR-1 bestätigt. Im Anschluss an dieses Experiment wurde die unterdrückende Wirkung der oralen Verabreichung von GBEs auf das Fortschreiten der Myopie anhand eines murinen LIM-Modells untersucht und es wurde festgestellt, dass die orale Verabreichung von GBEs Änderungen der Brechung und der axialen Länge hemmen kann. Anschließend wurde unter der Bedingung einer Myopie-Induktion und keiner Myopie-Induktion beim Vergleich der Veränderungen der Aderhautblutperfusion bei Mäusen, denen GBEs oral verabreicht wurden, mit Mäusen, denen keine Myopieinduktion verabreicht wurde, festgestellt, dass die orale Verabreichung von GBEs die Aderhautblutperfusion bei Mäusen mit oder ohne Myopie-Induktion signifikant steigerte. Darüber hinaus wurde mittels Echtzeit-PCR auch eine signifikante Hochregulierung von Egr-1- und eNOS-mRNA nach oralen GBEs bestätigt. Die Abnahme der Aderhautdicke wurde nach oraler Verabreichung von GBEs in einem murinen LIM-Modell abgeschwächt.

Die Hauptkategorie der aktiven Wirkstoffe von GBEs sind die Ginkgolide, die Bilobalide (auch als Terpene bekannt) und die Flavonoide45,46. Flavonoide haben die Fähigkeit, die Blutarterien zu erweitern, indem sie die Freisetzung von endothelialen Entspannungsfaktoren und Prostacyclin steigern47. Frühe Studien haben den Einfluss von GBEs auf den Blutfluss festgestellt. In Tiermodellen wurde nachgewiesen, dass die orale Verabreichung von GBEs die zerebrale und myokardiale Ischämie deutlich lindert und nachfolgende ischämische Schäden reduziert48,49,50. Bei der Anwendung von Augenerkrankungen kam es nach oraler Gabe von GBEs zu einer Erhöhung der enddiastolischen Geschwindigkeit in der Augenarterie und der Augendurchblutung, was ein großes therapeutisches Potenzial für einige ischämische Augenerkrankungen hat und derzeit als potenzielle Behandlungsoption eingesetzt wird Normaldruckglaukom35,51,52. In unserer Forschung wurde OCTA zum ersten Mal in einem Mausmodell verwendet, um die Veränderungen der Aderhautblutperfusion mit und ohne orale Verabreichung von GBEs zu bewerten. Vor unserer Studie gab es Studien, in denen OCTA zur Messung der Aderhautblutperfusion in kurzsichtigen Meerschweinchenmodellen verwendet wurde38,39,53. Diese Studien liefern starke technische Unterstützung für die Anwendung von OCTA in Mausmodellen. Das OCTA kann Bildrauschen in Sekundenschnelle reduzieren, die Detailgenauigkeit erhöhen und die Sichtbarkeit sowie die Genauigkeit der Messung der Aderhautblutperfusion verbessern54. Unser Experiment zeigte intuitiv, dass mit oder ohne Myopie-Induktion nach 3-wöchiger GBEs-Ernährung eine erhöhte Aderhautblutperfusion festgestellt wurde. und kombinierte die Eigenschaften von GBEs bei der Verbesserung der Aderhautblutperfusion mit der Hemmung des Fortschreitens der Myopie, was Hinweise auf den Zusammenhang zwischen Myopie und Aderhautblutperfusion liefert.

Um den möglichen Mechanismus zur Unterdrückung des Fortschreitens der Myopie durch die Verabreichung von GBEs zu überprüfen, verwendeten wir Echtzeit-PCR, um die Expression von Egr-1 und eNOS in der Netzhaut und der Aderhaut nach dreiwöchiger oraler Verabreichung von GBEs nachzuweisen. Der Grund für die Beobachtung der eNOS-Expression liegt darin, dass frühere Studien gezeigt haben, dass eNOS den Gefäßtonus und die Angiogenese reguliert und dass seine Expression in Arterien, die einem höheren Blutfluss ausgesetzt sind, erhöht war55,56. In Übereinstimmung mit den Ergebnissen des In-vitro-Experiments war die Egr-1-Expression nach oraler Verabreichung von GBEs sowohl in der Aderhaut als auch in der Netzhaut signifikant hochreguliert. Bei der Expression von eNOS zeigte die Aderhaut eine beträchtliche Hochregulierung der eNOS-Expression, wohingegen die Netzhaut einen tendenziellen, aber keinen statistisch signifikanten Anstieg zeigte. Diese Ergebnisse entsprechen einer durch OCTA ermittelten Steigerung der Aderhautblutperfusion. Daher gehen wir davon aus, dass es zwei unterschiedliche Mechanismen geben kann, durch die GBEs das Fortschreiten der Myopie unterdrücken. Erstens unterdrückt es das axiale Augenwachstum, indem es die Expression von Egr-1 in der Aderhaut und der Netzhaut hochreguliert. Darüber hinaus spekulieren wir aus unseren experimentellen Ergebnissen, dass die Verabreichung von GBEs die Hochregulierung der eNOS-Expression in der Aderhaut induziert, was die glatten Gefäßmuskelzellen entspannen, die Gefäßgefäße der Aderhaut erweitern, die Durchblutung der Aderhaut erhöhen und die Dicke der Aderhaut und deren Position aufrechterhalten kann der Netzhaut, was zu einer Unterdrückung der Entwicklung von Myopie führt. Darüber hinaus haben einige Studien auch gezeigt, dass die Behandlung mit GBEs die Dopaminfreisetzung im medialen präfrontalen Kortex der Ratte erhöht57,58. Dopamin, als wichtiger Neurotransmitter der Netzhaut, fördert seine Freisetzung und kann die Entwicklung von Myopie hemmen59. Es wird gefolgert, dass ein weiterer Mechanismus, durch den GBEs das Fortschreiten der Myopie hemmen, darin bestehen könnte, dass sie die Freisetzung von Dopamin in der Netzhaut induzieren, was durch weitere Experimente bestätigt werden muss.

Allerdings weist diese Studie einige Einschränkungen auf. Um die unterdrückende Wirkung auf das Fortschreiten der Myopie zu verifizieren, wurde nur eine Konzentration von 0,0667 % der GBEs ausgewählt. Die Auswahl der oralen Verabreichungskonzentration von GBEs wurde anhand mehrerer Berichte über pharmakologische Tests von GBEs an Mäusen zusammengefasst. Es wurde über orale Dosierungen von 100 bis 400 mg/kg berichtet, und es wurde festgestellt, dass GBEs-Dosierungen von mehr als 200 mg/kg bei Nagetieren zu Hepatotoxizität führen60,61,62,63,64. In diesem Experiment stellten wir 0,0667 % GBE mit Futter her, was 200 mg/kg entspricht, um dessen unterdrückende Wirkung auf das Fortschreiten der Myopie zu überprüfen. Da die verwendete Arzneimittelkonzentration beträchtlich hoch war, sind weitere Studien erforderlich, um mehrere Gruppen mit unterschiedlichen Konzentrationen festzulegen, um die optimale Konzentration von GBEs bei oraler Verabreichung zur Unterdrückung des Fortschreitens der Myopie besser zu verstehen.

Da die Prävalenz von Myopie weltweit rasch und kontinuierlich zunimmt, ist es dringend erforderlich, Methoden zur Kontrolle von Myopie bei Kindern zu erforschen und zu entwickeln. Bisher ist unsere Forschung die erste, die zeigt, wie GBEs, ein natürlicher Extrakt, Kurzsichtigkeit bei Mäusen wirksam kontrolliert. Als vorläufige Forschung auf der Grundlage klinischer Studien legte unsere Forschung den Grundstein für die Forschung zur Unterdrückung des Fortschreitens der Myopie durch die Verabreichung von GBEs und bietet die Möglichkeit für nachfolgende dosisbezogene Experimente. Für den Menschen sind GBEs im Allgemeinen gut verträglich und harmlos, können jedoch auch einige Nebenwirkungen verursachen. Es wurde berichtet, dass die empfohlene Höchstdosis für GBEs 240 mg/Tag für Erwachsene beträgt65, es liegen jedoch keine endgültigen Studien zu empfohlenen Dosen für Kinder vor. Für künftige prospektive klinische Studien sind Themen, die einer ausführlichen Diskussion bedürfen, wie die sichere Dosis bestimmt und die Wirkung von GBEs auf die Myopiehemmung bei Kindern voll ausgenutzt werden kann.

Das Institutional Animal Care and Use Committee der Keio University hat alle Operationen genehmigt (Genehmigungsnummer: 16017). Alle Methoden und Versuchsprotokolle folgten den Richtlinien der National Institutes of Health (NIH) für die Arbeit mit Labortieren und der ARVO Animal Statement for the Use of Animals in Ophthalmic and Vision Research. Auch unsere Studie folgte den ARRIVE-Richtlinien und dem Zufallsprinzip.

Die 293AAV-Zelllinie ist von der Elternzelllinie 293 abgeleitet und wurde von Cell Biolabs, Inc. nach Klonierung und mehreren Testrunden entwickelt (Cell Biolabs, Inc., Kalifornien, USA, Kat.-Nr. AAV-100). Die vom Unternehmen erworbene HEK 293AAV-Zelllinie wurde mit dem Egr1-Luciferase-Reportergenkonstrukt (Cignal Lenti EGR1 Reporter (Luc), Qiagen, Venlo, Niederlande) transfiziert, um die EGR-1-Transkriptionsaktivität zu überwachen. Die Methode folgte der zuvor berichteten Vorgehensweise22. Kurz gesagt, das Virus Cignal Lenti Egr-1 Reporter Luc (QIAGEN, Niederlande #CLS-5021L) wurde verwendet, um Zellen weniger als 20 Stunden lang mit dem SureENTRY-Transduktionsreagenz (QIAGEN, Niederlande #336.921) zu infizieren. (25 MOI). Nach der Infektion wurden die Zellen einmal passagiert und dann gezüchtet, bis keine infizierten Zellen vollständig abgestorben waren. Fünf Kolonien wurden aufgenommen und in 2,0 × 104 Zellen/Well in der HTS Transwell®-96 Receiver Plate ausgesät. Unter allen Zelllinien, die mit dem von unserem Labor erworbenen Egr-1-Luciferase-Reportergenkonstrukt transfiziert wurden, war die HEK 293AAV EGR-1-Luc-Zelllinie die fähigste, die EGR1-Aktivität nach PMA-Behandlung (Positivkontrolle) stabil zu exprimieren, also diese Zelle Die Linie wurde als reaktivste Kolonie für den Screening-Assay ausgewählt.

Der Luciferase-Assay wurde wie zuvor beschrieben durchgeführt22. Die HEK 293AAV EGR-1-Zellen, die zweimal passagiert wurden, wurden auf HTS Transwell®-96 Receiver Plate, White, TC-Treated, Sterile (Corning, New York, USA #3783) übertragen und mit jeweils 70 µl Medium mit 10 % FBS versetzt Well und die Anzahl der Zellen pro Well betrug 2,0 × 104, inkubiert über Nacht bei 37 °C in einem 5 % CO2-Inkubator. GBEs (INDENA JAPAN CO., Tokio, Japan Nr. 9,033,008) wurde gewogen und in DMSO (Wako, Tokio, Japan Nr. 043-07,216) gelöst, um eine 100 mg/ml-Lösung zu bilden, und nach Rühren über Nacht bei Raumtemperatur vor Licht geschützt stehen gelassen . Lösen Sie den Überstand in DMSO im Verhältnis 1:400, 2:400, 3:400 auf, sodass die Endkonzentration 0,25 mg/ml, 0,50 mg/ml und 0,75 mg/ml beträgt, und geben Sie 70 µl in jede Vertiefung. Die Zellen wurden 18 Stunden lang bei 37 °C in einem 5 % CO2-Inkubator inkubiert.

Es wurde eine Positivkontrolle von 100 nM PMA (Promega, USA Nr. V1171 oder Abcam, England Nr. 16,561-29-8) eingesetzt, das als EGR-1-Aktivator bekannt ist66. Als Negativkontrolle wurden DMSO-haltige Medien ohne jegliche Chemikalien verwendet. Die von uns verwendete Konzentration an GBEs betrug 0,25 mg/ml, 0,50 mg/ml bzw. 0,75 mg/ml. Zunächst einmal haben wir in früheren Studien herausgefunden, dass 0,25 mg/ml Crocetin die maximale in DMSO lösliche Konzentration darstellt, was in einem Luciferase-Assay eine signifikante Egr-1-Aktivierung induzierte22. Basierend auf dieser Erfahrung haben wir 0,25 mg/ml GBEs als bevorzugte Konzentration konfiguriert. Zweitens haben mehrere Studien bei Mäusen bestätigt, dass GBEs, die mehr als eine tägliche Dosis von 200 mg/kg erhalten, bei Nagetieren zu Hepatotoxizität führen können62,63,64. Nach der Konzentrationsumrechnung beträgt die experimentelle In-vivo-Konzentration, die der Fütterungskonzentration von 200 mg/kg/Tag entspricht, 0,50 mg/ml. Daher haben wir als zweite Konzentration 0,5 mg/ml GBEs festgelegt. Schließlich wurde 0,75 mg/ml GBEs als dritte Konzentration festgelegt, um die Veränderung der EGR-1-Aktivität unter Bedingungen ultrahoher Konzentration in vitro zu untersuchen. Zur Quantifizierung der Luciferase-Expression wurde das ONE-GloTM Luciferase Assay System (Promega, Madison, Wisconsin, USA #E6110) verwendet. Nach dem gleichmäßigen Mischen von 10 ml Glo™ Luciferase-Assay-Puffer und 1 Fläschchen ONE-Glo™ Luciferase-Assay-Substrat des ONE-Glo™ Luciferase-Assay-Systems fügen Sie 70 µl pro Vertiefung hinzu. Wir identifizieren die Fluoreszenzintensität bei Synergy HTX (Biotek, Vermont, USA) unter den folgenden Bedingungen: lineares Schütteln für 30 s, Verzögerung für 12 min, Verstärkung 180, Integrationszeit 0,5 s und Lesehöhe 1,0 mm.

C57BL6/J-Mäuse (CLEA, Shizuoka, Japan) wurden in herkömmlichen transparenten Mauskäfigen (29 × 18 × 13 cm) zu je vier oder fünf Mäusen pro Käfig in einem klimatisierten Raum mit einer Temperatur von 23 ± 3 °C und 12 Stunden gehalten Tageszeit und uneingeschränkter Zugang zu normaler Nahrung (MF, Oriental Yeast Co., Ltd, Tokio, Japan) und Leitungswasser. Da die durchschnittliche Nahrungsaufnahme einer 10-g-Maus bei mit GBEs gefütterten Mäusen etwa 3 g pro Tag beträgt67,68, erfolgte die Fütterung gemäß der von uns berechneten ungefähren wöchentlichen Nahrungsaufnahme pro Käfig. Das Gewicht der Mäuse wurde wöchentlich aufgezeichnet, um sicherzustellen, dass die GBEs-Fütterung ihre Gewichtszunahme im Vergleich zu Mäusen mit normaler Nahrungsaufnahme nicht beeinträchtigte. Die Aufzeichnungen zeigten keinen signifikanten Unterschied im Körpergewicht zwischen der Gruppe mit normaler Nahrungsaufnahme und der Gruppe mit GBEs-Fütterung (ergänzende Abbildung 3). Wechseln Sie einmal pro Woche Futter, Leitungswasser und Käfig, um sicherzustellen, dass der Lebensraum der Mäuse sauber ist. Für die Anästhesie wurde die Anästhesiedosis an das Körpergewicht jeder Maus angepasst, um sicherzustellen, dass etwa 0,1 ml/10 g Anästhesie verabreicht wurden. Um Fehler zu minimieren, wurden in allen Experimenten Mäuse gleichen Geschlechts (männlich) und gleichen Gewichts (10 ± 1 g) verwendet und alle Mäuse wurden zufällig zugeordnet. Um die Einheitlichkeit des Experiments sicherzustellen und den Einfluss objektiver Faktoren auf die experimentellen Ergebnisse zu minimieren, wurden alle Mäuse während des gesamten Experiments unter einheitlichen Licht- und Temperaturbedingungen gehalten, um sicherzustellen, dass die Messzeit jedes Experiments konsistent und der Durchschnitt ist Es wurde versucht, die Messzeit jeder Maus gleich zu halten.

Wie bereits berichtet wurde ein murines LIM-Modell erstellt40. Wir haben ein Maus-Brillengestell erstellt, das sich an die Kontur des Mauskopfes anpasst, und es mit einem dreidimensionalen Drucker ausgedruckt. Zur Myopie-Induktion wurde eine negative 30-D-Linse aus PMMA entwickelt. Die Myopie-Induktion mit der −30 D-Linse zeigte eine größere Myopie-Verschiebung im Vergleich zum Formdeprivations-Myopie-Modell40. Mit einigen Unterschieden zum zuvor verwendeten LIM-Modell verwendeten wir die binokulare Myopie-Induktion anstelle der monokularen Induktion. Das linke und das rechte Auge der Brille wurden an die Form des Mäuseschädelrahmens angepasst und mit einer Schraube am Stock befestigt. Anschließend wurde der Stock mit einem selbsthärtenden Zahnklebstoffsystem am Mäuseschädel festgeklebt. Dies erfolgte unter Vollnarkose mit der Kombination aus Midazolam (Sandoz KK, Minato, Japan), Medetomidin (Domitor®, Orion Corporation, Turku, Finnland) und Butorphanoltartrat (Meiji Seika Pharma Co., Ltd., Tokio, Japan). (MMB). Die Dosierung für jede Maus betrug 0,01 ml/g.

Während der Myopie-Induktionsphase erhielten die Mäuse entweder normales (MF, Oriental Yeast Co., Ltd, Tokio, Japan) oder gemischtes Futter mit der Kandidatenchemikalie 0,0667 Prozent GBEs (INDENA JAPAN CO., Tokio, Japan #9,033,008). 0,0667 % GBEs enthalten 24 % der Flavonolglykoside von Quercetin, Kaempferol und Isorhamnetin sowie 6 % Terpentrilactone. Die entsprechende Konzentration an GBEs-Mischfutter betrug 200 mg/kg/Tag, was mit der Konzentration an GBEs übereinstimmt, die die signifikant hohe Aktivität von EGR-1-In-vitro-Experimenten verursacht. Die Zugabe von GBEs und die Herstellung von gemischtem Futter mit 0,0667 % GBEs werden alle von einem Futterhersteller (Oriental Yeast Co., LTD., Tokio, Japan) hergestellt.

Zu Beginn (3 Wochen alt) und im Abschlussstadium (6 Wochen alt) der Myopie-Induktion wurden Refraktion, Achsenlänge und Aderhautdicke mit einem Infrarot-Photorefraktor (Steinbeis-Transferzentrum, Stuttgart, Baden-Württemberg) gemessen. Deutschland) und einem SD-OCT-System (Envisu R4310, Leica, Microsystems, Wetzlar, Deutschland). Alle Messungen wurden mit Mydriasis-Augentropfen mit 0,5 % Tropicamid und 0,5 % Phenylephrin (Santen Pharmaceutical Co., Ltd, Osaka, Japan) und alle unter MMB-Vollnarkose durchgeführt. Die Brechungswerte wurden mit einer kontinuierlichen Datenspur gemessen. Zusammen mit der Hornhautscheitelreflexion wurde die axiale Länge von der vorderen Hornhautoberfläche bis zum retinalen Pigmentepithel gemessen40. Die Aderhautdicke wurde gemäß dem vorherigen Bericht22,69 gemessen. Kurz gesagt, die mittlere Aderhautdicke wurde anhand des von der Bandscheibe entfernten Aderhautbereichs an der Grenze des retinalen Pigmentepithels und der hinteren Oberfläche der Aderhaut berechnet. Der Radius bei 0,5 mm von der Ringscheibe entfernt wurde durch quantitative ImageJ-Analyse (National) ermittelt Institutes of Health, Bethesda, Bethesda, Maryland, USA). Anschließend wurde die durchschnittliche Dicke der Aderhaut bestimmt, indem die Fläche durch den Umfang geteilt wurde.

Um die Auswirkungen von Ernährungsfaktoren auf Brechung, Achsenlänge und Aderhautdicke bei Mäusen zu vergleichen, wurden 3 Wochen alte C57BL6/J-Mäuse zufällig in die Kontrollgruppe mit 0 D, die Kontrollgruppe mit −30 D und die GBEs mit −30 aufgeteilt D-Gruppe. Die Kontrollgruppe mit 0 D und die Kontrollgruppe mit −30 D wurden mit normalem Futter gefüttert und trugen 0 D-Linsen bzw. − 30 D-Linsen auf beiden Augen. Die GBEs − 30 D-Gruppe wurde mit 0,0667 % GBEs-Mischfutter gefüttert, während sie − 30 D-Linsen auf beiden Augen trug. Während dieser Zeit wurde gleichzeitig eine Myopie-Induktion durchgeführt. Sowohl die Fütterung als auch die Myopie-Induktion wurden im Alter von 3 bis 6 Wochen durchgeführt. Da wir die binokulare Myopie-Induktion anstelle der monokularen Myopie-Induktion verwendeten, wurden die Daten von jedem Auge unabhängig analysiert. Um die Auswirkungen von Ernährungsfaktoren auf die Durchblutung der Aderhaut bei Mäusen zu vergleichen, wurden 3 Wochen alte C57BL6/J-Mäuse nach dem Zufallsprinzip in vier Gruppen eingeteilt, wobei zwei Gruppen eine normale Diät und eine GBEs-Diät ohne Myopie-Induktion erhielten und die anderen beiden Gruppen erhielten während der Myopie-Induktion eine normale Diät und eine GBEs-Diät. Sie wurden im Alter von 3 bis 6 Wochen gefüttert.

Die Durchblutung der Aderhaut wurde im Anfangsstadium (3 Wochen alt) und im Endstadium (6 Wochen alt) mit einem SS-OCT/OCTA-Gerät (XEPHILIO OCT-S1, CANON Medical Systems, Tokio, Japan) gemessen. Dabei kommt die Swept-Source-Technologie zum Einsatz, damit die Lichtquelle tief in den Augenhintergrund vordringen kann und ein großer Bereich vom Glaskörper bis zur Netzhaut, Aderhaut und Skleragrenze in hoher Auflösung abgebildet werden kann. OCTA bestimmt den Blutfluss in vivo durch Analyse von Intensitätsschwankungen und Phaseninformationen aus der Mobilität roter Blutkörperchen, die durch wiederholte OCT-Scans an derselben Stelle beobachtet werden70,71. Ein quadratischer Bereich von 9 mm (Breite) \(\times\) 9 mm (Länge) zentriert auf dem Sehnerv wurde ausgewählt, um ein En-Face-Angiogramm zu erstellen, während 464 aufeinanderfolgende OCTA-B-Scans auf der Ebene der gesamten Netzhaut-Aderhaut- An jeder Aufnahmeposition wurden Sklera erhalten, um die Veränderungen des Blutperfusionssignals an verschiedenen Positionen zu beobachten. Da es für jede Angiographie ein passendes B-Scan-Bild gibt, wurden in unserer Forschung B-Scan-Bilder, die der En-Face-Angiographie im zentralen Bereich des Sehnervs entsprechen, als einheitlicher Standard analysiert. Im B-Scan-Bild stellten wir fest, dass kein roter Punkt die Aderhautgefäße bedeckte, und die Ergebnisse, die wir nach der Berechnung des Bereichs erhielten, der nicht von roten Punkten als Aderhautblutperfusion bedeckt war, stimmten mit den vorhandenen Forschungsergebnissen, d. h. Aderhautblut, überein Die Durchblutung nahm mit der Induktion von Myopie ab38. Daher gingen wir davon aus, dass bei den C57BL6/J-Mäusen das Blutperfusionssignal unterhalb des RPE aufgrund der reichlich vorhandenen Pigmentpartikel in der RPE-Schicht umgekehrt ist. Der Bereich ohne Blutperfusion ist mit roten Rauschpunkten bedeckt, die auch als Flow Voids (FVs) bezeichnet werden, und einige Studien haben ergeben, dass die Aderhautblutperfusion negativ mit den FVs von Choriocapillaris korreliert72,73. In dieser Studie haben wir das Polygonauswahltool von ImageJ verwendet, um die gesamte Aderhautregion im B-Scan-Bild zu umkreisen und das Flächenverhältnis der FVs in der gesamten Aderhautregion zu analysieren. Hierbei handelte es sich um eine algorithmische Schwellenwertauswahl, die zur Berechnung des Rotanteils verwendet wurde Pixel. Die Durchblutung der Aderhaut wurde berechnet, indem der Prozentsatz der nichtroten Pixel im Verhältnis zur Anzahl der Gesamtpixel bewertet wurde.

Nachdem die Durchblutung der Aderhaut mittels OCTA beurteilt worden war, wurde den Mäusen eine Überdosis MMB injiziert, um eine starke Anästhesie zu erzeugen, und sie wurden durch Zervixluxation eingeschläfert. Anschließend wurden die Augäpfel entkernt, um Aderhaut- und Netzhautgewebe zu trennen, die sofort in flüssigem Stickstoff eingefroren und bei –80 °C aufbewahrt wurden.

Für die Echtzeit-PCR wurden Gewebe in TRI-Reagenz (MOR, Miami, FL, USA #TR118) lysiert, um denaturierte Proteine zu solubilisieren und Gewebe-RNA abzutrennen. Fügen Sie RWT (QIAGEN, Hilden, Deutschland, Nr. 1.067.933) und RPE (QIAGEN, Hilden, Deutschland, Nr. 1.018.013) hinzu, die in EtOH im Verhältnis 1:2 und 1:4 gelöst wurden, um kleine RNAs zu isolieren und die Spuren davon zu entfernen Salze. RNA-Proben wurden in Rnase-freiem Wasser (TAKARA HOLDINGS INC., Kyoto, Japan, 9012) gelöst und mit einem Spektrophotometer (NanoDrop; ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, USA) zur Genexpressionsanalyse gemessen.

Die Extrakt-RNA (200 ng) wurde unter Verwendung von 4xDN Master Mix mit gDNA-Entferner (TOYOBO, Osaka, Japan, #FSQ-301), 5xRT Master MixII.SYBR green RT-PCR wurde unter Verwendung von THUNDERBIRD SYBR qPCR Mix (TOYOBO, Japan, #FSQ-301) in cDNA umgewandelt. Osaka, Japan, #QPS-201) und die PCR wurde mit dem StepOnePlus Real-Time PCR System (Applied Biosystems, Waltham, Massachusetts, USA) durchgeführt. Zur Quantifizierung der differentiellen Genexpression wurde die 2 − ΔΔCt-Methode verwendet, die dann auf das Referenzgen (GAPDH) standardisiert wurde. Die Primersequenzen für qPCR waren wie folgt: Maus EGR-1 vorwärts: ccacaacaacaggagaccCT, Maus EGR-1-Rückwärts. Ttttggctccac

Alle Ergebnisse werden als Mittelwert ± Standardabweichung (SD) ausgedrückt und mithilfe eines Blindverfahrens analysiert. Zur Beurteilung der statistischen Signifikanz der Unterschiede wurde ein unabhängiger T-Test oder eine einfache ANOVA verwendet (Microsoft Excel 2003, USA), und Ergebnisse mit p-Werten < 0,05 wurden als signifikant angesehen. Die Leistungsanalyse wurde im Cancer Research Network (SWOG) durchgeführt und für Ergebnisse mit einem p-Wert < 0,05 verwendet, wobei die berechnete Trennschärfe alle größer als 0,8 ist.

Alle während dieser Studie generierten oder analysierten Daten sind in diesem veröffentlichten Artikel und seinen ergänzenden Informationsdateien enthalten.

Holden, BA et al. Globale Prävalenz von Myopie und hoher Myopie sowie zeitliche Trends von 2000 bis 2050. Ophthalmology 123(5), 1036–1042 (2016).

Artikel PubMed Google Scholar

Yotsukura, E. et al. Aktuelle Prävalenz von Myopie und Zusammenhang von Myopie mit Umweltfaktoren bei Schulkindern in Japan. JAMA Ophthalmol. 137(11), 1233–1239 (2019).

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Bullimore, MA & Richdale, K. Myopiekontrolle 2020: Wo stehen wir und wohin gehen wir?. Augenphysiol. Opt. 40(3), 254–270 (2020).

Artikel PubMed Google Scholar

Hussaindeen, JR et al. Umgang mit der Myopie-Epidemie und der digitalen Augenbelastung nach der COVID-19-Pandemie – Was müssen Augenärzte wissen und umsetzen? Indian J. Ophthalmol. 68(8), 1710 (2020).

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Wang, J. et al. Fortschreiten der Myopie bei Kindern im schulpflichtigen Alter nach COVID-19-Heimarrest. JAMA Ophthalmol. 139(3), 293–300 (2021).

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Leo, SW Aktuelle Ansätze zur Myopiekontrolle. Curr. Meinung. Ophthalmol. 28(3), 267–275 (2017).

Artikel PubMed Google Scholar

Singh, H. et al. Präklinische und zelluläre Toxizitätsbewertung von 7-Methylxanthin: ein Prüfpräparat zur Behandlung von Myopie. Arzneimittelchem. Toxicol. 44(6), 575–584 (2021).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Huang, L. et al. Kombinationseffekt von Aktivitäten im Freien und Bildschirmexposition auf das Risiko einer Kurzsichtigkeit im Vorschulalter: Ergebnisse der Longhua-Kinderkohortenstudie. Vorderseite. Öffentliche Gesundheit 9, 126 (2021).

Artikel Google Scholar

Jiang, X. et al. Violettes Licht unterdrückt linseninduzierte Myopie über Neuropsin (OPN5) bei Mäusen. Proz. Natl. Acad. Wissenschaft. 118(22), e2018840118 (2021).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Jonas, JB et al. IMI-Prävention von Myopie und ihrem Fortschreiten. Investieren. Ophthalmol. Vis. Wissenschaft. 62(5), 6–6 (2021).

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Read, SA, Collins, MJ & Vincent, SJ Lichtexposition und körperliche Aktivität bei kurzsichtigen und emmetropischen Kindern. Optom. Vis. Wissenschaft. 91(3), 330–341 (2014).

Artikel PubMed Google Scholar

Thorne, HC et al. Tägliche und saisonale Variation der spektralen Zusammensetzung der Lichtexposition beim Menschen. Chronobiol. Int. 26(5), 854–866 (2009).

Artikel PubMed Google Scholar

Foulds, WS, Barathi, VA & Luu, CD Progressive Myopie oder Hyperopie kann bei Küken induziert und durch Manipulation der Chromatizität des Umgebungslichts umgekehrt werden. Investieren. Ophthalmol. Vis. Wissenschaft. 54(13), 8004–8012 (2013).

Artikel PubMed Google Scholar

Torii, H. et al. Die Exposition gegenüber violettem Licht kann eine vorbeugende Strategie gegen das Fortschreiten der Myopie sein. EBioMedicine 15, 210–219 (2017).

Artikel PubMed Google Scholar

Torii, H. et al. Die Übertragung von violettem Licht hängt mit dem Fortschreiten der Myopie bei Erwachsenen mit hoher Myopie zusammen. Wissenschaft. Rep. 7(1), 1–8 (2017).

Artikel CAS Google Scholar

Li, T. et al. Bewertung von EGR1 als Kandidatengen für hohe Myopie. Mol. Vis. 14, 1309 (2008).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Ashby, RS et al. Die Egr-1-mRNA-Expression ist ein Marker für die Richtung des Augenwachstums bei Säugetieren. Investieren. Ophthalmol. Vis. Wissenschaft. 55(9), 5911–5921 (2014).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Fischer, AJ et al. Licht- und fokusabhängige Expression des Transkriptionsfaktors ZENK in der Netzhaut von Küken. Nat. Neurosci. 2(8), 706–712 (1999).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Schippert, R. et al. Relative axiale Myopie bei Egr-1 (ZENK)-Knockout-Mäusen. Investieren. Ophthalmol. Vis. Wissenschaft. 48(1), 11–17 (2007).

Artikel PubMed Google Scholar

Schippert, R., Feldkaemper, M. & Schaeffel, F. Axiale Myopie bei Egr-1-Knockout-Mäusen. Investieren. Ophthalmol. Vis. Wissenschaft. 47(13), 3326–3326 (2006).

Google Scholar

Schippert, R., Schaeffel, F. & Feldkaemper, MP Microarray-Analyse der retinalen Genexpression in Egr-1-Knockout-Mäusen. Mol. Vis. 15, 2720 (2009).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Mori, K. et al. Die orale Verabreichung von Crocetin unterdrückte die Brechungsverschiebung und die axiale Verlängerung in einem Mausmodell für linseninduzierte Myopie. Wissenschaft. Rep. 9(1), 1–10 (2019).

Artikel Google Scholar

Mori, K. et al. Die Wirkung einer Nahrungsergänzung mit Crocetin zur Myopiekontrolle bei Kindern: eine randomisierte klinische Studie. J. Clin. Med. 8(8), 1179 (2019).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Zimmermann, M. et al. Ginkgo biloba-Extrakt: von molekularen Mechanismen bis zur Behandlung der Alzheimer-Krankheit. Zelle. Mol. Biol. 48(6), 613–623 (2002).

CAS PubMed Google Scholar

Smith, J. & Luo, Y. Studien zu molekularen Mechanismen von Ginkgo biloba-Extrakt. Appl. Mikrobiol. Biotechnologie. 64(4), 465–472 (2004).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Diamond, BJ et al. Ginkgo biloba-Extrakt: Mechanismen und klinische Indikationen. Bogen. Physik. Med. Rehabilitation. 81(5), 668–678 (2000).

CAS PubMed Google Scholar

Pereira, E., Barros, L. & Ferreira, IC Chemische Charakterisierung von Ginkgo biloba L. und antioxidative Eigenschaften seiner Extrakte und Nahrungsergänzungsmittel. Ind. Nutzpflanzen Prod. 51, 244–248 (2013).

Artikel CAS Google Scholar

Zhang, N. et al. Antibakterieller Mechanismus des Ginkgo-biloba-Blattextrakts bei Anwendung auf Shewanella putrefaciens und Saprophytic Staphylococcus. Aquakult. Fisch. 3(4), 163–169 (2018).

Google Scholar

Jiao, YB et al. Expression entzündungsfördernder und entzündungshemmender Zytokine im Gehirn atherosklerotischer Ratten und Wirkungen von Ginkgo biloba-Extrakt 1. Acta Pharmacol. Sünde. 26(7), 835–839 (2005).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Kotakadi, VS et al. Ginkgo biloba-Extrakt EGb 761 hat entzündungshemmende Eigenschaften und lindert Kolitis bei Mäusen, indem es die Effektor-T-Zell-Apoptose fördert. Karzinogenese 29(9), 1799–1806 (2008).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Ahmed, HH et al. Ginkgo biloba L.-Blattextrakt bietet mehrere Mechanismen bei der Eindämmung von N-Methylnitrosoharnstoff-vermitteltem experimentellem Darmkrebs. Biomed. Pharmakotherapeut. 95, 387–393 (2017).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Wu, X. et al. Isolierung, Reinigung und In-vitro-Antitumoraktivität von Polysaccharid aus Ginkgo biloba sarcotesta. Kohlenhydrate. Polym. 86(2), 1073–1076 (2011).

Artikel CAS Google Scholar

Zhang, X. et al. Auswirkungen der Fütterung fermentierter Ginkgo biloba-Blätter auf die Dünndarmmorphologie, Absorption und Immunmodulation früher Lipopolysaccharid-infizierter Küken. Geflügel. Wissenschaft. 92(1), 119–130 (2013).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Shenoy, KA, Somayaji, S. & Bairy, K. Bewertung der hepatoprotektiven Aktivität von Ginkgo biloba bei Ratten. Indian J. Physiol. Pharmakol. 46(2), 167–174 (2002).

CAS PubMed Google Scholar

Kang, JM & Lin, S. Ginkgo biloba und seine mögliche Rolle beim Glaukom. Curr. Meinung. Ophthalmol. 29(2), 116–120 (2018).

Artikel PubMed Google Scholar

Park, JW et al. Kurzfristige Auswirkungen von Ginkgo biloba-Extrakt auf den peripapillären Netzhautblutfluss bei Normaldruckglaukom. Koreanisch J. Ophthalmol. 25(5), 323–328 (2011).

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Grudzińska, E. & Modrzejewska, M. Moderne Diagnosetechniken zur Beurteilung der Augendurchblutung bei Myopie: aktueller Wissensstand. J. ophthalmol. 2018, 1–6 (2018).

Artikel Google Scholar

Zhang, S. et al. Veränderungen der Aderhautdicke und der Aderhautdurchblutung bei Meerschweinchen-Myopie. Investieren. Ophthalmol. Vis. Wissenschaft. 60(8), 3074–3083 (2019).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Zhou, X. et al. Eine erhöhte Durchblutung der Aderhaut kann die Formdeprivationsmyopie bei Meerschweinchen hemmen. Investieren. Ophthalmol. Vis. Wissenschaft. 61(13), 25–25 (2020).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Jiang, X. et al. Ein hocheffizientes Mausmodell für experimentelle Myopie. Wissenschaft. Rep. 8(1), 1–12 (2018).

ADS Google Scholar

Flores-Moreno, I. et al. Die Beziehung zwischen axialer Länge und Aderhautdicke bei Augen mit hoher Myopie. Bin. J. Ophthalmol. 155(2), 314–319 (2013).

Artikel PubMed Google Scholar

Kim, KH Die Beziehung zwischen Brechkraft, axialer Länge und Aderhautdicke, gemessen mittels SD-OCT bei Myopie. J. Korean Ophthalmol. Soc. 53(5), 626–631 (2012).

Artikel Google Scholar

Woodman, EC, Read, SA & Collins, MJ Axiale Längen- und Aderhautdickenänderungen, die mit einer verlängerten Akkommodation bei Myopen und Emmetropen einhergehen. Vision. Res. 72, 34–41 (2012).

Artikel PubMed Google Scholar

Muhiddin, HS et al. Aderhautdicke im Zusammenhang mit Achsenlänge und Myopiegrad. Vision 6(1), 16 (2022).

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Mashayekh, A. et al. Auswirkungen von Ginkgo biloba auf den zerebralen Blutfluss, bewertet durch quantitative MR-Perfusionsbildgebung: eine Pilotstudie. Neuroradiology 53(3), 185–191 (2011).

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Schneider, LS Ginkgo biloba-Extrakt und Vorbeugung der Alzheimer-Krankheit. JAMA 300(19), 2306–2308 (2008).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Sabaner, MC et al. Ginkgo Biloba beeinflusst die mikrovaskuläre Morphologie: eine prospektive Pilotstudie zur optischen Kohärenztomographie-Angiographie. Int. Ophthalmol. 41(3), 1053–1061 (2021).

Artikel PubMed Google Scholar

Sun, BL et al. Auswirkungen des Extrakts von Ginkgo biloba auf Krämpfe der Basilararterie und zerebrale Mikrozirkulationsperfusion bei Ratten mit Subarachnoidalblutung. Klin. Hämorheol. Mikrozirkul. 29(3–4), 231–238 (2003).

Google Scholar

Sun, B.-L. et al. Auswirkungen von Ginkgo biloba-Extrakt auf den intrakraniellen Druck, den zerebralen Perfusionsdruck und den zerebralen Blutfluss in einem Rattenmodell einer Subarachnoidalblutung. Int. J. Neurosci. 117(5), 655–665 (2007).

Artikel PubMed Google Scholar

Pietri, S. et al. Kardioprotektive und antioxidative Wirkung der Terpenoidbestandteile des Ginkgo biloba-Extrakts (EGb 761). J. Mol. Zelle. Cardiol. 29(2), 733–742 (1997).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Chung, HS et al. Ginkgo-biloba-Extrakt erhöht die Blutflussgeschwindigkeit im Auge. J. Ocul. Pharmakol. Dort. 15(3), 233–240 (1999).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Labkovich, M. et al. Ginkgo biloba-Extrakt bei ophthalmischen und systemischen Erkrankungen, mit Schwerpunkt auf Normaldruckglaukom. Asien-Pazifik J. Ophthalmol. (Philadelphia Pa) 9(3), 215 (2020).

Artikel Google Scholar

Zhou, X. et al. Eine verminderte Durchblutung der Aderhaut führt bei Meerschweinchen zu Myopie. Investieren. Ophthalmol. Vis. Wissenschaft. 62(15), 30–30 (2021).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Coscas, G., Lupidi, M. & Coscas, F. Heidelberg Spectralis optische Kohärenztomographie-Angiographie: technische Aspekte. OCT Angiogr. Ret. Macul Dis. 56, 1–5 (2016).

Artikel Google Scholar

Partovian, C. et al. PKCα aktiviert eNOS und erhöht den arteriellen Blutfluss in vivo. Zirkel. Res. 97(5), 482–487 (2005).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Lam, C.-F. et al. Ein erhöhter Blutfluss führt zu einer koordinierten Hochregulierung des arteriellen eNOS und der Biosynthese von Tetrahydrobiopterin. Bin. J. Physiol.-Herzkreislauf. Physiol. 290(2), H786–H793 (2006).

Artikel CAS Google Scholar

Yoshitake, T., Yoshitake, S. & Kehr, J. Der Ginkgo biloba-Extrakt EGb 761® und seine Hauptbestandteile Flavonoide und Ginkgolide erhöhen den extrazellulären Dopaminspiegel im präfrontalen Kortex der Ratte. Br. J. Pharmacol. 159(3), 659–668 (2010).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Kehr, J. et al. Ginkgo biloba-Blattextrakt (EGb 761®) und seine spezifischen acylierten Flavonolbestandteile erhöhen den Dopamin- und Acetylcholinspiegel im medialen präfrontalen Kortex der Ratte: mögliche Auswirkungen auf die kognitionsfördernden Eigenschaften von EGb 761®. Int. Psychogeriatr. 24(S1), S25–S34 (2012).

Artikel PubMed Google Scholar

Zhou, X. et al. Dopaminsignalisierung und Myopieentwicklung: Was sind die größten Herausforderungen? Prog. Retin. Augenres. 61, 60–71 (2017).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Tian, J. et al. Ginkgo biloba-Blattextrakt mildert Arteriosklerose bei Streptozotocin-induzierten diabetischen ApoE-/-Mäusen, indem er den Stress des endoplasmatischen Retikulums durch Wiederherstellung der Autophagie über den mTOR-Signalweg hemmt. Oxidat. Med. Zelle. Longev. 2019 (2019).

Park, YJ et al. Ginkgo biloba-Extrakt EGb 761-vermittelte Hemmung der Aromatase zur Behandlung von hormonabhängigem Brustkrebs. Lebensmittelchem. Toxicol. 87, 157–165 (2016).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Waidyanatha, S. et al. Systemische Exposition gegenüber Ginkgo biloba-Extrakt bei männlichen F344/NCrl-Ratten: Relevanz für den Menschen. Lebensmittelchem. Toxicol. 131, 110586 (2019).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Hoenerhoff, MJ et al. Hepatozelluläre Karzinome bei B6C3F1-Mäusen, die 2 Jahre lang mit Ginkgo-biloba-Extrakt behandelt wurden, unterscheiden sich von spontanen Lebertumoren hinsichtlich Krebsgenmutationen und genomischen Signalwegen. Toxicol. Pathol. 41(6), 826–841 (2013).

Artikel PubMed Google Scholar

Auerbach, SS et al. Exomsequenzierung von frisch gefrorenen oder formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten hepatozellulären B6C3F1/N-Mauskarzinomen, die entweder spontan oder aufgrund chronischer chemischer Exposition auftreten. Toxicol. Pathol. 46(6), 706–718 (2018).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Unger, M. Pharmakokinetische Arzneimittelwechselwirkungen mit Ginkgo biloba. Arzneimittel-Metabol. Rev. 45(3), 353–385 (2013).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Akuzawa, N. et al. Der Zinkfinger-Transkriptionsfaktor Egr-1 aktiviert die Flt-1-Genexpression in THP-1-Zellen bei der Induktion zur Makrophagendifferenzierung. Arteriosklerose. Thromb. Vasc. Biol. 20(2), 377–384 (2000).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Bachmanov, AA et al. Nahrungsaufnahme, Wasseraufnahme und Trinkauslaufseitenpräferenz von 28 Mäusestämmen. Verhalten. Genet. 32(6), 435–443 (2002).

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Feige-Diller, J. et al. Die Auswirkungen verschiedener Fütterungsroutinen auf das Wohlbefinden von Labormäusen. Vorderseite. Tierarzt. Wissenschaft. 6, 479 (2020).

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Dysli, C. et al. Quantitative Analyse der Netzhautschichten von Mäusen mithilfe der automatisierten Segmentierung von Bildern der optischen Kohärenztomographie im Spektralbereich. Übers. Vis. Wissenschaft. Technol. 4(4), 9–9 (2015).

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

An, L. et al. Hochauflösende Weitfeld-Bildgebung der retinalen und choroidalen Blutperfusion mit optischer Mikroangiographie. J. Biomed. Opt. 15(2), 026011 (2010).

Artikel ADS PubMed PubMed Central Google Scholar

Wang, RK Optische Mikroangiographie: eine markierungsfreie 3D-Bildgebungstechnologie zur Visualisierung und Quantifizierung der Blutzirkulation in Gewebebetten in vivo. IEEE J. Sel. Spitze. Quantenelektron. 16(3), 545–554 (2009).

Artikel ADS Google Scholar

Zhang, Q. et al. Eine neuartige Strategie zur Quantifizierung von Choriocapillaris-Flusshohlräumen mittels Swept-Source-OCT-Angiographie. Investieren. Ophthalmol. Vis. Wissenschaft. 59(1), 203–211 (2018).

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Wu, H. et al. Beurteilung der Aderhautvaskularität und der Choriocapillaris-Blutperfusion bei anisomyopen Erwachsenen mittels SS-OCT/OCTA. Investieren. Ophthalmol. Vis. Wissenschaft. 62(1), 8–8 (2021).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

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Die Autoren danken Y. Soejima, K. Nishimaki, H. Aoyagi und M. Shidomi (ROHTO Pharmaceutical Co., Ltd. Tokio) für ihre kritische Diskussion. Vielen Dank an A. Ishida, S. Kurobane, N. Serizawa und C. Shoda (Graduate School of Medicine, Keio University, Tokio) für ihre technische Beratung und administrative Unterstützung. Patente wurden international angemeldet, basierend auf einem internationalen Patent WO2018/212152.

Die aktuelle Studie wurde finanziell von ROHTO Pharmaceutical Co., Ltd. unterstützt.

Diese Autoren haben gleichermaßen beigetragen: Jing Hou und Kiwako Mori.

Abteilung für Augenheilkunde, Keio University School of Medicine, 35 Shinanomachi, Shinjuku-ku, Tokio, 160-8582, Japan

Jing Hou, Kiwako Mori, Shin-ichi Ikeda, Heonuk Jeong, Hidemasa Torii, Kazuno Negishi, Toshihide Kurihara und Kazuo Tsubota

Labor für Photobiologie, Keio University School of Medicine, 35 Shinanomachi, Shinjuku-ku, Tokio, 160-8582, Japan

Jing Hou, Kiwako Mori, Shinichi Ikeda, Heonuk Jeong, Hidemasa Torii und Toshihide Kurihara

Tsubota Laboratory, Inc., 304 Toshin Shinanomachi-ekimae Bldg., 34 Shinanomachi Shinjuku-ku, Tokio, 160-0016, Japan

Kazuo Tsubota

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JH führte die Experimente durch, analysierte die Daten, erstellte Zahlen und verfasste das Manuskript. KM, TK und KT konzipierten die Studie, beteiligten sich an der Gestaltung und Koordination und halfen bei der Ausarbeitung des Manuskripts. Alle Autoren haben zur Überarbeitung des Manuskripts beigetragen. Die endgültige Fassung des Manuskripts wurde von allen Autoren genehmigt, die auch zustimmen, die Verantwortung für den Inhalt zu übernehmen.

Korrespondenz mit Toshihide Kurihara oder Kazuo Tsubota.

Außerhalb der eingereichten Arbeit gibt Kazuo Tsubota an, dass er CEO von Tsubota Laboratory, Inc., Tokio, Japan, ist, einem Unternehmen, das Produkte zur Behandlung von Myopie entwickelt. Die anderen Autoren erklären keine Interessenkonflikte.

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Nachdrucke und Genehmigungen

Hou, J., Mori, K., Ikeda, Si. et al. Ginkgo-biloba-Extrakte verbessern die Aderhautzirkulation und führen so zur Unterdrückung der Kurzsichtigkeit bei Mäusen. Sci Rep 13, 3772 (2023). https://doi.org/10.1038/s41598-023-30908-1

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Eingegangen: 18. August 2022

Angenommen: 03. März 2023

Veröffentlicht: 07. März 2023

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-023-30908-1

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Ginkgo-biloba-Extrakte verbessern die Aderhautzirkulation und führen so zur Unterdrückung der Kurzsichtigkeit bei Mäusen